DMEM 培養(yǎng)基

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時又分為高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點(diǎn)主要包括以下：

（1）氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍，且含有非必需氨基酸，如；

（2）維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍；

（3）含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸；

（4）含有微量的鐵離子。

注意事項(xiàng)：

（1）無菌操作：細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因，必須加強(qiáng)各個環(huán)節(jié)的無菌操作觀念，以預(yù)防為主，一旦污染，一般很難消除。

（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長的必要條件。由于細(xì)胞來源的動物種類、組織類型不同，對培養(yǎng)液的要求有一定的差異，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清：胎牛血清對于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用。可選擇多種不同批號的胎牛血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號胎牛血清后，就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。想了解血清的秘密，可以參考Nothing：關(guān)于血清，你不知道的太多了

（4）：必須新鮮配制，貯存時間過長(即使是-20℃低溫保存)，也將影響消化效力，導(dǎo)致消化時間過長，細(xì)胞損傷增加。

（5）L-幾乎所有細(xì)胞對有較高的要求，細(xì)胞需要核酸和蛋白質(zhì)，在缺時，細(xì)胞會因生長不良而死亡。液中很不穩(wěn)定，加有養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時，就應(yīng)重新加入原來量的

（6）靜置培養(yǎng)：原代細(xì)胞在消化分離后，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時72h)內(nèi)，應(yīng)處于絕對靜置狀態(tài)，切忌不時地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況，這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁，更談不上伸展和增殖，初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會消耗光，在細(xì)胞增殖之前對營養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。

（7）消化時間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可，因?yàn)榇藭r組織顆粒已經(jīng)松散，略經(jīng)吹打即成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，過久的消化往往導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重，細(xì)胞培養(yǎng)成活率降低。

（8）其他生長因子：經(jīng)過以上處理，一般原代分離細(xì)胞培養(yǎng)均可以成功。對于少數(shù)特殊類型細(xì)胞也可以考慮加一些特殊的生長因子，如胰島素能促使細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外，內(nèi)毒素、EGF、FGF等均有促有絲分裂作用，但費(fèi)用較高。

細(xì)胞培養(yǎng)最初認(rèn)識：

什么是細(xì)胞培養(yǎng)？ 細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，也可以來源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。

原代培養(yǎng)：

原代培養(yǎng)是指細(xì)胞從組織中分離出來后，在適宜條件下增殖，直到它們占據(jù)所有可用的基質(zhì)（即達(dá)到匯合狀態(tài)）的培養(yǎng)階段。在此階段，必須通過將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進(jìn)行繼代培養(yǎng)（即傳代），以為其提供更多的繼續(xù)生長空間。

細(xì)胞系：

第一次傳代培養(yǎng)后，原代培養(yǎng)物即被稱為細(xì)胞系。來自于原代培養(yǎng)的細(xì)胞系壽命有限（即：有限細(xì)胞系），隨著細(xì)胞的傳代，生長能力的細(xì)胞會占據(jù)優(yōu)勢，最終導(dǎo)致細(xì)胞群體在基因型和表型上達(dá)到一定程度的均一性。

細(xì)胞株：

如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細(xì)胞系的亞群，則該細(xì)胞系成為一個細(xì)胞株。與親代細(xì)胞系起始時相比，細(xì)胞株通常會獲得一些其他的遺傳學(xué)改變。

公司正在出售的產(chǎn)品：

769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞CTSL1/CTSL人組織蛋白酶L1ELISA檢測試劑盒

786-O 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞CTSH人組織蛋白酶HELISA檢測試劑盒

95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞Cath G Ab人組織蛋白酶G自身抗體ELISA檢測試劑盒

A-431[A431]人皮膚鱗癌細(xì)胞CTSC人組織蛋白酶CELISA檢測試劑盒

A875人黑色素瘤細(xì)胞HAT人組蛋白乙酰化酶ELISA檢測試劑盒

ACC-2人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞HDAC2人組蛋白脫乙酰化酶2ELISA檢測試劑盒

ACC-M人涎腺癌細(xì)胞HDAC3人組蛋白去乙酰化酶3ELISA檢測試劑盒

BEAS-2B人支氣管上皮樣細(xì)胞HDAC人組蛋白去乙酰化酶ELISA檢測試劑盒

BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞SETD7人組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7ELISA檢測試劑盒

C33A人子宮頸癌細(xì)胞H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B人組蛋白H3.3ELISA檢測試劑盒

Caki-2人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞tPSA人總前列腺特異抗原ELISA檢測試劑盒

CAL-27人舌鱗癌細(xì)胞TPC人總蛋白CELISA檢測試劑盒

Caov-3人卵巢癌細(xì)胞TBA人總膽汁酸ELISA檢測試劑盒

CaSki人宮頸癌上皮細(xì)胞NK人自然殺傷細(xì)胞ELISA檢測試劑盒

CCC-HPF-1人胚肺成纖維細(xì)胞NRAMP-2人自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白2ELISA檢測試劑盒

CNE-2Z人鼻咽癌細(xì)胞NRAMP-1人自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白1ELISA檢測試劑盒

COLO 201人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞TF人轉(zhuǎn)移因子ELISA檢測試劑盒

DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B人轉(zhuǎn)錄中介因子1-βELISA檢測試劑盒

DLD-1人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞DMEM 培養(yǎng)基SOX5人轉(zhuǎn)錄因子SOX-5ELISA檢測試劑盒

EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞SOX4人轉(zhuǎn)錄因子SOX-4ELISA檢測試劑盒

ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞AP-1人轉(zhuǎn)錄因子E2F1ELISA檢測試劑盒

FaDu人咽鱗癌細(xì)胞AP-1人轉(zhuǎn)錄因子1ELISA檢測試劑盒